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尼氏染色實驗代測服務項目:包埋→切片→尼氏染色→拍照→全景掃描→尼氏分析樣本運輸要求:常溫運輸(4%多聚甲醛固定,可加冰袋運輸)信帆提供各類實驗代測服務,更多服務項目歡迎致電咨詢,我們將竭誠為您服務!
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尼氏染色實驗代測
尼氏染色原理:
神經(jīng)元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒,即能夠代表粗面內質網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆粒可以用很多染色來顯示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質,也可以顯示神經(jīng)元的細胞核和神經(jīng)膠質。各種神經(jīng)細胞內都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內蛋白質合成的重要部位,當神經(jīng)元受到刺激后,胞體內的尼氏體會明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞-甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。
尼氏染色說明:
1、細胞可做染色,貼壁細胞做爬片后染色,懸浮細胞做滴片后染色。
2、拍照倍數(shù)分100倍,200倍,400倍。正常情況下拍照是200倍3張,400倍3張。
3、全景掃描可看任意倍數(shù)。
實驗操作步驟(僅供參考)
1、常規(guī)脫蠟至水(二甲苯I、二甲苯II各15min,然后梯度酒精脫水:100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min)
2、蒸餾水沖洗3次,每次5min
3、然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍染色40 min(或用焦油紫染色30s)
4、蒸餾水洗凈染料后,于分別置于70%,80%和95%以及100%乙醇中脫水,再用二甲苯透明
5、后用中性樹膠封片。
尼氏染色實驗代測
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